食用菌菌種沙土保藏法是將食用菌孢子保藏于干燥的無菌沙土中,保藏期為2一10年。具體方法如下:
1.取河沙過篩(60~80目篩子),除去大沙粒,用10%的鹽酸浸泡以除去有機物。鹽酸用量以淹沒沙面為宜。浸泡2~4h后,倒去鹽酸,用水洗幾次,直到接近中性,烘干或曬干。
2.沙與土比例以2 :l~4 :1為宜,沙過多影響菌種保藏質量,土過多時易結塊,接種后抽干困難。
3.把干沙、土按比例混合壓裝于安瓿管或小試管,裝入量以0.5~lcm為宜,加棉塞,高壓蒸汽滅菌(壓力在0.15MPa)滅菌3次,每次30min,干熱滅菌(160℃,2h)。待無菌檢查合格后(取少許干沙土放入牛肉湯培養(yǎng)液中,無菌生長)方可使用。
4.用接種環(huán)將孢子接于沙土管中拌勻即可。或將孢于接于5mL無菌水的試管中,充分播勻成孢于懸液,然后用lmL無菌吸管吸取孢子懸液加入沙土管中(每管加0.2mL)即可。
5.將接種后的沙土管置于盛有干燥劑(生石灰、氯化鈣或硅膠)的容器內,接上0.5KW的真空泵抽氣約8h,使沙土基本干燥。
6.經(jīng)抽樣檢查,證明無雜菌生長,即可封口進行保藏。